Introduction : Le syndrome de Leigh canadien français (LSFC), aussi nommé « acidose lactique du Saguenay-Lac-St-Jean », est une maladie génétique qui touche 1/2000 naissance dans cette région du Québec. Elle est causée par une mutation dans le gène LRPPRC qui mène à une diminution de l’activité du cytochrome c oxydase (COX), le complexe IV de la chaîne respiratoire mitochondriale.Cette déficience en COX est présente principalement dans le foie et le cerveau. L’atteinte importante de ces deux organes explique les crises d’acidose lactique et la détérioration neurologique dont sont victimes les jeunes patients. Ces crises peuvent être déclenchées par un apport excessif de nutriments, une infection ou un choc émotionnel. Elles mènent aussi inexorablement vers le coma ou la mort en peu de temps. Le but de cette étude était de caractériser les cellules microgliales, membres du système immunitaire du cerveau, dans un modèle murin de LSFC. Pour atteindre ce but, il fallait commencer par mettre au point le protocole expérimental et c’est sur cette étape que s’est concentré ce projet.Matériel et méthodes : Des cerveaux de souris de 5 et 11 semaines, réduits en poudre, avec et sans une délétion hépatique du gène LRPPRC étaient disponibles pour ce projet. Les protéines ont d’abord été extraites des échantillons, puis dosées. Ensuite, la mise au point de CD11b, un marqueur de la microglie, a été débuté par immunobuvardage Western.Résultats et discussion : Malgré plusieurs tentatives de mises au point, aucun essai n’a pu établir un protocole définitif concernant l’immunobuvardage. Cette absence de résultats peut s’expliquer par des problèmes d’émission de signal par les anticorps utilisés.Conclusion : Des expérimentations sont encore nécessaires afin de mettre au point la technique d’immunobuvardage Western avec l’anticorps CD11b. Ce projet de recherche a, néanmoins, pu offrir des pistes de solutions et des améliorations possibles concernant le protocole.Bourse PREMIER-Département de nutrition
