Présentations au département de pharmacologie 2012

Présentations

Présentations lors de la journée de la recherche du département de pharmacologie de l'Université de Montréal.

Le 17 mai prochain, nos 3 étudiants, Cristina, Christian et Ada, présenteront leurs résultats de recherche lors de la journée de la recherche Gabriel L-Plaa du département de pharmacologie de l'Université de Montréal. L'entrée est ouverte à tous.

Publications connexes

Implication de la glutaminase dans l'insuffisance hépatique chronique.

Ada Rivera, Cristina R. Bosoi, Mélanie Tremblay, Christopher F. Rose.

L’encéphalopathie hépatique (EH), un syndrome métabolique neuropsychiatrique, est une complication majeure de la maladie hépatique. L'EH est caractérisée par des troubles cognitifs, psychiatriques et moteurs allant jusqu'au coma hépatique et la mort. Les causes de l'EH sont multifactorielles et encore assez peu connues. L’ammoniaque, neurotoxique, est considérée comme le facteur principal. Celle-ci est produite par la dégradation des protéines au niveau intestinal. Elle est détoxiquée par le cycle d'urée dans le foie, une voie métabolique qui permet d’éliminer de l’organisme les excès d’azote d’origine endogène ou exogène. Au cours de l’insuffisance hépatique chronique, le cycle d’urée est déficient et en conséquence une concentration anormalement élevée d’ammoniaque circule dans le sang (hyperammoniémie) et atteint le cerveau. L’ammoniaque peut aussi être produite par désamination de la glutamine en glutamate et en ammoniaque par la glutaminase, une enzyme exprimée dans les hépatocytes périportaux. La glutaminase est également exprimée dans les cellules épithéliales des tubules rénaux, où l'ammoniaque produit est excrétée sous forme d'ions ammonium, un mécanisme important de la fonction rénale de la régulation acide-base. On la retrouve aussi dans le cerveau où elle joue un rôle essentiel dans la production du neurotransmetteur glutamate. L’hypothèse du projet est que la glutaminase joue un rôle fondamental dans le développement de l’hyperammoniémie dans l’insuffisance hépatique chronique. Ce projet a comme objectif principal de mesurer l’activité enzymatique (par dosage enzymatique) et l’expression (par immunobuvardage) de la glutaminase dans le rein, le foie et le cerveau lors d’insuffisance hépatique chronique induite chez le rat. Les résultats de ce travail nous permettront de comprendre le rôle de la glutaminase dans l’hyperammoniémie observée chez les patients atteints d’insuffisance hépatique chronique.

Le rôle de l'encéphalopathie hépatique dans la susceptibilité accrue à l’insulte neuronale induite par hypotension/ hypoxie cérébrale.

Christian Parent-Robitaille, Cristina R. Bosoi, Mélanie Tremblay, Christopher F. Rose.

Introduction: L'encéphalopathie hépatique (EH), une complication grave de la maladie du foie, se manifeste par un syndrome métabolique neuropsychiatrique complexe mais ayant toujours été considérée comme réversible. La transplantation hépatique (TH) est le seul traitement efficace pour traiter les patients de maladie hépatique, par contre les complications neurologiques survenant suite à une TH restent un problème persistant. Avec l’EH pré-TH, l'hypotension et une hypoxie cérébrale pendant la période péri-opératoire peuvent affecter les fonctions neurologiques. Ces observations nous ont conduits à l'hypothèse suivante: un patient cirrhotique atteint d’EH est plus à risque de subir des dommages cérébraux suite à une insulte d’hypotension/hypoxie. Méthodes: Pour vérifier cette hypothèse, nous évaluons l’effet d’une hypotension/hypoxie cérébrale chez un rat avec ligature de la voie biliaire (BDL) de 6 semaines (modèle établi de la maladie chronique du foie et de l’EH). Les animaux ont été sacrifiés et leurs cerveaux ont été évalués pour une perte/altération cellulaire par marquage neuronal (au violet de crésyl et par immunohistochimie avec NeuN) ainsi que pour détecter des protéines pro- et anti-apoptotiques (par western blot). Résultats: Jusqu’à maintenant, nous avons démontré qu’une hypotension/hypoxie cérébrale de 90 minutes ne cause pas de perte neuronale ni une augmentation de marqueurs apoptotiques dans le cerveau de rats encéphalopatiques comparativement aux cerveaux de rats normaux. Conclusions: Nous sommes présentement en train d’évaluer les cerveaux de rats ayant subi une hypotension/hypoxie de 30 minutes. À cause de la fragilité d’un cerveau encéphalopatique, nous croyons qu’une hypotension/hypoxie moindre pourrait donner lieu à une plus grande perte/altération cellulaire que dans un cerveau normal. Nous allons par la suite utiliser d’autres techniques telles que le marquage avec fluorojade, un marqueur d’apoptose et TUNEL une méthode pour détecter fragmentation de l'ADN

L'inhibition de la xanthine oxydase atténue l'oedème cérébral chez des rats avec insuffisance hépatique chronique.

Cristina R. Bosoi, Christian Parent-Robitaille, Mélanie Tremblay, Christopher F. Rose.

Introduction: L’insuffisance hépatique mène à l’hyperammonémie, le facteur principal de l’encéphalopathie hépatique (EH). Toutefois, le stress oxydatif peut avoir un rôle important dans l’exacerbation des effets neuropsychologiques de l’hyperammonémie chez les patients atteints de maladies hépatiques, dont l’œdème cérébral. Les rats cirrhotiques développent l’hyperammonémie et l’œdème cérébral, mais aussi une augmentation des espèces réactives d’oxygène (ROS) plasmatiques suite à une augmentation de l’activité de la xanthine oxydase. Afin de mieux comprendre la relation entre l’ammoniaque et le stress oxydatif dans la pathogenèse de l’œdème cérébral, dans cette étude nous avons investigué l’effet de l’allopurinol, un inhibiteur de la xanthine oxydase, chez des rats cirrhotiques. Méthodes: La cirrhose a été induite suite à une ligature de voie biliaire (BDL) pendant 6 semaines. Des rats BDL et contrôles SHAM-opérés ont reçu l’allopurinol (100 mg/kg/jour pour les derniers 10 jours). Des groupes contrôles BDL et SHAM-opérés ont reçu de la saline. L’ammoniaque et les ROS ont été mesurés dans le plasma (artériel) par, respectivement, un kit commercial et une technique de fluorescence. Le contenu en eau du cerveau a été mesuré dans le cortex frontal par une technique spécifique gravimétrique. Résultats: Chez les rats BDL traités avec allopurinol, nous avons observé une diminution significative des ROS et de l’ammoniaque systémique vs les rats BDL non-traités, aux valeurs similaires de celles des rats SHAM. Le contenu en eau du cerveau a été normalisé suite au traitement avec allopurinol. Conclusion: Le traitement avec allopurinol diminue les ROS et l’ammoniaque plasmatique et atténue l’œdème cérébral. Cela a démontré que le stress oxydatif joue un rôle dans le métabolisme de l’ammoniaque et dans la pathogenèse de l’œdème cérébral. Nos résultats suggèrent qu’un traitement antioxydant dirigé vers l’inhibition de la production des ROS pourrait être bénéfique dans le traitement de l’EH.