Labo hépato-neuro

HPLC

Technique chromatographique permettant l’analyse d’échantillons complexes.

Technique chromatographique permettant l'analyse d'un échantillon complexe, comme le liquide céphalo-rachidien ou le sang. D'abord, on traite l'échantillon pour ajouter, par réaction chimique, un fluorophore aux molécules. On applique ensuite cet échantillon sur une colonne enduite d'un composé hydrophobe (les molécules s'y lieront). Un tampon aqueux circule dans le système sans affecter les liaisons protéines-colonne. Par la suite, on introduit un tampon hydrophobique graduellement. Les molécules du tampon hydrophobique compétitionneront les interactions présentes dans la colonne, entraînant avec lui l'échantillon. Un détecteur lira la fluorescence. Comme le pourcentage du deuxième tampon augmente avec le temps, les interactions seront détruites graduellement, ce qui permet de séparer chacune des molécules de l'échantillon (celles-ci ayant toutes des propriétés différentes, affectant ainsi la liaison).

Chaque pic représente une substance différente (ici, des acides aminés) alors que la hauteur du pic reflète la quantité.
Chaque pic représente une substance différente (ici, des acides aminés) alors que la hauteur du pic reflète la quantité.